PCR测试是从中检测冠状病毒'一种鼻咽拭子。 ©Robert Kneschke,Adobe Stock
健康

Covid-19筛选:PCR测试是什么?

问题/答案分类:新冠病毒 , 筛选 , 实时PCR
 

[视频] Covid19诊断:测试点  最近,我们对CVIV19诊断测试进行了很多谈论了很多。他们如何工作?他们各自的有用性和可靠性是多少?细节。  

当你打算让你é追踪分析实验室中的冠状病毒,我们éalise un « test PCR »。该测试旨在放大GéCoronavirus名词在é素描确认他的公关é或不。他在哪个原则是基于的?

考验 dépistage 为了 新冠病毒 est basé sur une méthode de 摩尔éculaire appelée PCR (聚合酶链反应 或者 réaction en chaîne 通过 聚合物érase)它是一种使用的例行技术ée几乎可以放大的所有生物实验室écifiquement un 脱氧核糖核酸 d'intérêt aprèr的几个周期é生物化学行动。

如果是 SARS-CoV-2,我们必须说更多précisément de RT-PCR.,因为 génome病毒 是A. 摩尔écule d'RNA.。为了éterminer la quantité冠状病毒RNA的相对é南方鼻咽éES,我们使用RT-PCR呼叫的变体é定量RT-PCR。这里有étapes de ce test :

首先ère étape consiste à ré慢劳思鲁斯在ad den的冠状病毒的RNAémentaire ou cDNA 随后将被放大é. Cette étape est assurée par une ADN-polymérase-ARN-dépendante qui synthé刺激单链cDNA的表带à来自ARN矩阵。第二股是合成的étisé grâce à引物和聚合物DNAérase,

来自à, les étapes sont les mê我的pcr。 PCR循环包括étapes suivantes :

1éPCR测试的胶带:Dénaturation

首先ère étape est la dénaturation。经典上,这是关于加热éSantaillon 10.à 15 minutes à 95 °C. Lors de cette é胶带,CDNA SE的两条链é父母。当一个人开始新的放大周期时,它是é磁带短且允许écrocher la polymérase.

保密ère éPCR循环的磁带,Dé诞生。两缕DNA Baticénaire se séparent. © Université de Strasbourg

2è étape du test PCR : l’hybridation

在此期间'杂交, 谁是éroule à une tempé率包括在50到60之间°C,引物很短é固定的DNA特征écifiquement à l'ADN à放大。底漆成对操作:感觉和方向感。底漆意义(5'-3')将作为基础élongation 反向链和反感底漆(3'-5')将作为基础é股线的孤独(5'-3')。温度érature de cette é根据引物的TM选择胶带épendent de leur séquence.

第二ème éPCR周期的磁带,hybridation. Les amorces se fixent sur chacun des brins. Ici l'amorce 1 est sens et l'amorce 2 anti-sens© Université de Strasbourg

3ème étape du test PCR : l’élongation

L'élongation est réalisé经典古典地 Taq Polym.érase, 一种 摘自 Bact..éries 积极的潜艇à 72 °C. La Taq polymé场景附加到底漆和合成器é刺激一股阿迪夫émentaire à la matrice grâce aux désoxyribonuclé古怪的中间可用。这个的长度étape dé悬挂从扩增子的大小。

第三ème éPCR周期的磁带,é渴望。 Taq Polym.érase symbolisée圆形橙色合成器étise le brin complé使用D.ésoxyribonucléotides (dNTPS). © Université de Strasbourg

APRUMès cette é录像带,循环恢复é目标。周期将维持èdent jusqu'à que la quantité扩增子足够重要être détecté。当涉及定量PCR时,我们标记int DNAérê与荧光探针允许遵循荧光的增加,因此达到数量éDNA,在周期上。这个éthode s'oppose à最终PCR O.ù我们分析了PCR的产物à所有周期的结束 électrophorèse 当然 凝胶 d'琼脂糖.

所有这些é胶带完全自动化ées et réalisé在一个电话里é热循环。差异érents réactifs nécessaires àPCR由实验室产品提供商出售。有许多不同的套件é有人物éristiques différentes. Le ministère de la Santé a mis en ligne 授权套件清单és pour le dé跟踪冠状病毒.

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